Sigma.DN25-10MG 脱氧核糖核酸酶 I 来源于牛胰腺 10MGSigma-Aldrich


货品编号:Sigma.DN25-10MG

品牌: Sigma

品名: 脱氧核糖核酸酶 I 来源于牛胰腺

规格: 10MG

一般描述

DNase I(脱氧核糖核酸酶I)是一种从牛胰腺分离的核酸内切酶。

我们的DNase I可将双链和单链DNA酶解成寡核苷酸和单核苷酸。

牛胰腺DNase存在四种异构酶A, B, C和D,均具有不同的等电点:5.22, 4.96, 5.06及4.78.3。主要形式为A,其次为B和C,D所占的比例最小。

DNase I结构类似于核酸外切酶III。其中包括两个中央β折叠。每个β折叠由六个β-链组成。这种复杂的β折叠被大量环形和螺旋形区域包围。

该酶结构类似于核酸外切酶III。[1]

应用

从原代细胞分离液中去除DNA,在降低粘度的同时提高产量:

将标记碱基掺入DNA:DNA缺口

放射性标记

生物工艺应用:DNA去除

在RT-PCR前从RNA制剂中去除基因组DNA

体外转录

缺口平移

DNase足迹

肌动蛋白调控胞内肌动蛋白聚合和细胞凋亡

蛋白质与核酸紫外线交联

DNase参与调控胞内肌动蛋白聚合,同时参与细胞凋亡过程 [1]

用于从蛋白质样品中除去 DNA。

包装

10, 100 mg in poly bottle

1, 5 g in poly bottle

生化/生理作用

DNase I是一种内切核酸酶,可作用于与嘧啶相邻的磷酸二酯键以产生具有末端5′-磷酸的聚核苷酸。当Mg2+存在时,DNAse I可独立

切割DNA的每条链且切割位点是随机的。当Mn2+存在时,两条DNA链都几乎是在同样的位置被切割。二价阳离子如Mn2+, Ca2+,

Co2+以及Zn2+都是酶的激活剂。5 mM浓度的Ca2+可稳定酶免收蛋白水解酶的消化。最适pH在7-8之间。来自牛胰腺的DNAse I由四

种色谱可区分的组分A,B,C和D组成,它们的摩尔比分别为4:1:1。仅发现少量D。2-巯基乙醇、螯合剂、十二烷基硫酸钠(SDS)和

肌动蛋白都已知可抑制酶的活性。

特点和优势

我们的脱氧核糖核酸酶DNAse I基本属于不含RNAse产品,支持该产品应用。

单位定义

一Kunitz单位的酶在以I型或III型DNA作为底物时,在 pH 5.0,37°C的条件下在每mL中每分钟可引起0.001的A260改变。

外形

粗制品,含有氯化钙

制备说明

溶液0.15 M NaCl的10 mg/mL DNAse I溶液分装保存在−20 °C一周后可能会丢失<10%的活性。同样的溶液保存在2-8 °C则可能丢失约20%的

活性。当在pH 5和7之间时,它可在60 °C维持活性最长达五小时,并在68 °C <10分钟内丢失活性。它在乙酸缓冲液(pH 5.0)和tris缓冲液

((pH 7.2),1 mg/mL浓度)中以6%/小时的速率丢失活性。

分析说明

通过缩二脲法测定的蛋白质。

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