货品编号: 碧云天.ST081
品牌: 碧云天
品名: G-418
规格: 1g
G418 Sulfate (G418硫酸盐),也称作Geneticin (遗传霉素)、G418、G 418或者G-418,是一种结构类似于庆大霉素B1 (Gentamycin B1)的氨基糖苷类抗生素,来源于Micromonospora rhodorangea,常用于筛选表达neo基因的真核或原核多克隆或单克隆细胞。G418不仅用于稳定细胞株的筛选,也用于稳定细胞株的维持。本产品的50mg/ml包装经过过滤除菌,可以直接用于细胞培养。
在细菌、酵母、原生动物、蠕虫、高等植物和哺乳动物中,遗传霉素通过抑制蛋白合成而抑制或杀死细胞。其作用机制为遗传霉素能够与70S和80S核糖体结合,从而阻断肽链延伸,干扰蛋白合成。其抗性基因(主要为neo基因)位于转座子Tn601 (903)或Tn5(来源于细菌),可以在真核细胞中表达。通过基因重组技术将这些抗性基因导入细胞,使细胞表达抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶(amino-glycoside 3’-phosphotransferase,APH(3)II),从而获得对G418的耐药性,用来筛选和维持培养携带抗性基因的原核或者真核细胞。
哺乳动物细胞中,当抗性基因neo被整合进真核细胞基因组后,编码表达氨基糖苷磷酸转移酶(amino-glycoside 3’-phosphotransferase,APH(3)II)。此酶通过共价修饰G418的氨基或羟基功能,抑制抗生素-核糖体间的相互作用,从而使得抗生素失活。这一特性赋予细胞产生抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长。进行稳转细胞株筛选实验时,需要建立剂量反应曲线(dose-response curve or kill curve)确定杀死无抗性细胞的最低有效浓度。
植物细胞中,通过转染携带nptII基因的抗性质粒孵育其抗性。nptII基因也能编码表达氨基糖苷磷酸转移酶,这个酶使得多种抗生素丧失活性,包括 G418,卡那霉素和巴龙霉素。
G 418与新霉素同为氨基糖苷类抗生素,都可被Neo基因产物失活,因此都可以用于筛选携带Neo抗性基因的细胞,新霉素筛选的细胞都可以用G418替代。
化学性质
化学名 | (2S,3S,4S,5S)-2-[(1S,2S,3R,4S,6R)-4,6-diamino-3-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-amino-4,5-dihydroxy-6-(1-hydroxyethyl)oxan-2-yl]oxy-2-hydroxycyclohexyl]oxy-5-methyl-4-(methylamino)oxane-3,5-diol;sulfuric acid |
化学式 | C20H40N4O102H2SO4 |
分子量 | 692.71 |
CAS号 | 108321-42-2 |
纯度 | ~98% |
本产品50mg/ml包装为水溶液,经0.22μm滤膜过滤除菌,可以直接用于细胞培养。本产品1g和5g包装为粉末装。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
ST081-1ml | G418 (遗传霉素) | 50mg/ml×1ml |
ST081-5ml | G418 (遗传霉素) | 50mg/ml×5ml |
ST081-1g | G418 (遗传霉素) | 1g |
ST081-5g | G418 (遗传霉素) | 5g |
- | 说明书 | 1份 |
保存条件:
粉末装4℃保存,长期保存可置于-20℃,避免受潮,至少三年有效,溶液装-20℃保存避免反复冻融。
注意事项:
本品不可高压灭菌。
G418不要和其它抗生素/抗真菌剂(如青霉素/链霉素)共同使用,因为它们是G418的竞争性抑制剂。其它的抗生素也会产生交叉活性。
G418加入培养体系中,未转染的细胞有可能不会被杀死,原因在于药物浓度过低,或者细胞密度过高。另外,快速分裂的细胞相对于缓慢增殖细胞,更容易被杀死。对照细胞(未转染)可能在添加抗生素5-7天后才能被杀死,转染细胞(抗性克隆子)的克隆需要10-14天形成。
即使加入有效剂量的G418,细胞可能会继续分裂2-3次。G418的药效通常在2天后才变得明显。
本产品可能对人体有一定的毒害作用,请注意适当防护,以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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