产品英文名称：Indo 1-AM

产品中文名称：Indo 1-AM 钙指示剂、钙荧光探针

Indo 1-AM 产品简介

• 分 子 式: C47H51N3O22

• 分 子 量: 1009.91

• 外 观: 灰黄色固体

• 别 名: Indo 1-AM

• 纯 度: 97%以上（HPLC）

• 储存条件: -20℃

• 运输条件: 室温

Indo 1-AM 的产品特性

Indo 1是一种经过改进的适用于比率法的钙指示剂、钙荧光探针。两个用于Indo 1比率法检测的发射波长分别为410 nm和480 nm。Indo 1适合使用流式细胞仪通过比率法检测，这样可以测得双波长的荧光信号。有报道称Indo 1在进入细胞后的定位能力要强于Fura 2。Indo 1-AM是Indo 1 的乙酰甲酯衍生物，它通过培养能够进入活细胞。

Indo 1-AM 的操作说明(for Human T cells)

试剂:

2 mM的Indo 1-AM/DMSO

Pluronic F127

Hanks' balanced salt solution (HBSS)

HEPES buffer saline (10 mM HEPES, 1 mM Na2HPO4, 137 mM NaCl, 5 mM KCl, 1 mM CaCl2, 0.5 mM MgCl2, 5 mM glucose, 0.1% BSA, pH 7.4)

操作:

1. 配制2mM的Indo 1-AM/DMSO溶液即：将1mg Indo 1-AM溶于495ulDMSO中（推荐现配现用）。

2.Pluronic F127先用DMSO配制成5%（W/V）的溶液，室温保存。使用时加入到上述Indo 1-AM/DMSO溶液至终浓度0.05%（W/V）.

Pluronic F127可以防止Indo 1-AM在HBSS中聚合并能帮助其进入细胞。

3. 用HBSS稀释Indo 1-AM溶液，制备4 µM的Indo 1-AM working solution。

4. 将Indo 1-AM working solution加入细胞，在37 ℃培养20分钟。

5. 加入5倍体积的含有1%胎牛血清的HBSS，再继续培养40分钟。

6. 用HEPES buffer saline洗涤细胞3次，然后用HEPES buffer saline使细胞重悬浮，制成1x105 cells/ml的溶液。

7. 37 ℃下培养10 分钟，然后用该细胞进行荧光钙离子检测。

8. 观察528 nm (excitation: 490-500 nm)时的荧光。

*标记的条件因细胞种类而异，在每次实验前，请先确定最佳条件。以上方法仅供参考。