产品英文名称:Total Glutathione Quantification Kit
产品中文名称:总谷胱甘肽测定试剂盒
Total Glutathione Quantification Kit 产品特性
比色微板法检测
高灵敏的DTNB循环检测
检测范围从1 μg-100 μg
Total Glutathione Quantification Kit 概述
谷胱甘肽(GSH)是动物组织,植物组织,细菌和酵母内最为丰富的巯基(SH)化合物。GSH具有多种功能,如抵御活性氧和维持蛋白巯基等。在这些反应中,GSH转变为GSSG(二硫代谷胱甘肽: 谷胱甘肽的氧化型)。由于GSSG会被谷胱甘肽还原酶酶促还原,因此GSH是机体内的主要存在形式。
DTNB(5,5’-二硫基-双(2-硝基苯甲酸)),一种Ellman试剂,可以用来检测巯基化合物。1985年,Dr.M.E.Anderson建立了利用谷胱甘肽在DTNB和谷胱甘肽还原酶作用下循环反应来检测谷胱甘肽含量的高灵敏度的方法。DTNB和谷胱甘肽(GSH)反应,生成2-nitro-5-thiobenzoic acid(2-硝基-5-硫代苯甲酸)以及GSSG。由于2-硝基-5-硫代苯甲酸为一种黄色产物,通过测量其在412 nm处的吸光度就能确定样品中GSH的浓度。GSSG在谷胱甘肽还原酶作用下生成GSH,然后再和DTNB反应再次生成2-硝基-5-硫代苯甲酸。因此,这种循环反应使得总谷胱甘肽含量的检测灵敏度大大加强了。
Total Glutathione Quantification Kit 试剂盒内容
- Substrate (DTNB)……….…..2小管
- Enzyme Solution…………….50 μl × 1小管
- Coenzyme (冷冻干燥).……...2小管
- Standard GSH (冷冻干燥)..…1小管
- Buffer solution…………...…..50 ml × 1瓶
Total Glutathione Quantification Kit 贮藏条件
未开封的试剂盒可在0-5℃保存1年。Substrate Working Solution、Coenzyme working solution 和GSH Standard Solution可在-20℃保存2个月,enzyme solution可在4℃下保存2个月(无需冻融)。
Total Glutathione Quantification Kit 注意事项
1.请在室温下使用试剂盒中的试剂。
2.建议每组样品设定3个复孔,以便得到更准确的数据。
3.由于加入Substrate working solution之后会立刻产生显色反应, 因此尽量使用多通道移液器以减少各孔之间的误差。
4.如不知道样品中总谷胱甘肽含量的浓度范围, 就请准备多个浓度梯度的样品溶液。
5.本试剂盒不适合测定GSSG。
6.试剂盒中有带铝盖的玻璃管,请小心拿取。
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