产品英文名称：IgG Purification Kit-A

产品中文名称：IgG纯化试剂盒-A

IgG Purification Kit-A 产品特性

整个过程在1支过滤管中进行

抗体回收率在70%-90%

血清中的IgG纯度超过80%

30分钟内即可获得纯化后的IgG

重现性高且没有亲和损失

IgG Purification Kit-A 产品描述

IgG纯化试剂盒用于分离和纯化山羊、小鼠、兔及其他动物的免疫球蛋白G。该试剂盒包含固定的蛋白质A或G以及用于回收IgG的缓冲液。从血清或其他含有IgG的溶液中分离和纯化IgG的总时间约为30分钟。由于蛋白质A或G的支持物为硅胶，离心后凝胶上的残留溶液的体积非常小。因此，可用两次洗涤去除所有不与蛋白质A结合的蛋白质或其他物质。此外，洗脱过程中IgG的变性是最少的，因为结合到凝胶上的IgG的释放过程是非常快速的。此试剂盒中的凝胶可重复利用10次或更多次而效能不变。用过的凝胶在0-5℃的洗涤缓冲液中仍可稳定存放一年。

IgG Purification Kit-A 试剂盒内容

Protein A Cartridge tube………1 管

Elution buffer………1.8 ml × 1瓶

1.5 ml Microtube………5 管 × 2

Washing buffer………13 ml × 1瓶

Catching buffer………1 ml × 1瓶

IgG Purification Kit-A所需设备及材料

离心机，100-200 μl移液器，voltex混合器，0.5 ml微试管

IgG分离的一般操作方案

1. 将IgG和50 μl Washing buffer混合，制成50 μl样品溶液。

2. 将步骤1所制得的混合溶液加入到Protein A Pack所包含的筒式试管的小杯中，不要关闭管盖。

3. 用手指将杯旋转几次，以混合凝胶a)。把管放在室温下静置2分钟。

4. 盖上杯盖，以最大速度离心30秒。

5. 将滤出液再加入杯中，并重复步骤3和4 b)。将滤出液转移到0.5 ml管中，并在0-5℃存放c)。

6. 向杯中加入200 μl Washing buffer。不要关闭管盖。用手指将杯旋转几次，以混合凝胶a)。

7. 盖上杯盖，以最大速度离心30秒。丢弃储蓄池的滤出液。

8. 重复步骤6和7。

9. 向Protein A Pack中的1.5 ml管中加入60 μl Catching buffer。将杯转移到此管中d)。

10. 向杯中加入70 μl Elution buffer。不要关闭管盖。用手指将杯旋转几次，以混合凝胶a)。

11. 盖上杯盖并以最大速度离心30秒。

12. 重复步骤10和11。

13. 取出杯e)。盖上杯盖并用voltex混合。将溶液储存在0-5℃下f)。

a) 倾斜筒式试管并用手指使杯旋转10-20次。

b) 通过此步骤，IgG的回收率可以提高25-30%以上。可重复此步骤以得到最大的IgG回收率。

c) 如果IgG的回收率低，则使用此滤出液再次回收IgG。从步骤2开始按照操作说明进行实验。

d) 不要丢弃储蓄池。在步骤13中将用到它。

e) 将该杯放回步骤9中保留的储蓄池中。按照步骤6和7用洗涤缓冲液洗涤凝胶。加入200 μl洗涤缓冲液并使蛋白质A凝胶筒式试管保持在0-5℃中。离心该试管并在使用前去除洗涤缓冲液。

f) 可加入等量丙三醇，并储存于-20℃中。

IgG Purification Kit-A 注意事项

若IgG溶液含有明胶，在使用试剂盒之前可能需要先用酶消化