代理Beyotime P0013B RIPA Lysis Buffer 裂解液(强) 现货


产品名称:Beyotime RIPA裂解液(强)

产品货号:P0013B

英文名称:RIPA Lysis Buffer

产品规格:100ml

产品介绍:

碧云天生产的RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的PAGE、Western、免疫沉淀(immunol precipitation,IP)、免疫共沉淀(co-IP)和ELISA等。

本产品可以用于动物、植物的细胞或组织样品,也可以用于真菌或细菌样品。RIPA裂解液的配方有很多种,根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。

RIPA裂解液(强)的主要成分为50mM Tris(pH 7.4),150mM NaCl,1% Triton X-100,1% sodium deoxycholate,0.1% SDS,以及sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。

产品应用:

本产品可以用于动物、植物的细胞或组织样品,也可以用于真菌或细菌样品的组织裂解。

产品使用说明:

a.把组织切成细小的碎片。

b.融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM,或者根据实验需要加入适当的上述蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。

c.按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)

d.用玻璃匀浆器匀浆,或使用碧云天生产的E6600 TissueMaster™手持式组织研磨仪研磨,直至充分裂解。也可以把组织样品冷冻后液氮研磨,研磨充分后加入裂解液进行裂解。

e.充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。每20mg冻存的小鼠肝脏组织用200微升本裂解液裂解后获得的上清,其蛋白浓度约为15-25mg/ml,不同状态的不同组织有所不同。

f.如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器或研磨设备,缺点是不如匀浆或研磨那样裂解得比较充分。

注:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。

产品特点:

1.特殊的抗氧化剂有效地抑制样品在检测过程中产生新的MDA,使检测更加准确。同时本检测试剂盒在检测过程中可以把部分MDA天然形成的聚丙二醛分解成MDA,使对脂质氧化的测定更加准确。

2.本试剂盒可以检测低达1μM的MDA,也可检测高达200μM的MDA在本试剂盒的检测范围内,可以直接用本试剂盒检测血浆、血清、尿液样品等。

保存条件:

-20℃保存,一年有效。

产品订购信息:

关于公司:

Beyotime创办于2001年。近20年来专注于自主研发和生产。2007年成立上海碧云天生物技术有限公司,为特新“小巨人”企业,并进一步入选第二批第一年建议支持的专精特新“小巨人”企业, 也是G60科创走廊一类重点扶持企业和上海市专精特新中小企业。江苏碧云天为江苏省高新技术企业,南通市双创优企。公司主要研发生产生物、医学研究用试剂、试剂盒、消耗品和仪器设备。

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