wako Anti Iba1, Rabbit小胶质细胞/巨噬细胞特异性抗体
先关产品:
wako Anti Iba1, Rabbit ForImmunocytochemistry)
wako Anti Iba1, Rabbit 016-20001(forWesternBlotting)
Iba1:ionizedcalciumbindingadaptermolecule1小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体
钙离子是已知的所有细胞,包括中枢神经系统(CNS)细胞中最重要的信号调解人之一。钙离子通过与各种钙结合蛋白结合发挥信号活动,其中许多钙结合蛋白被划分成一个大的蛋白家族,EF手性蛋白家族。Iba1是一个17kDa的EF手性蛋白,在巨噬细胞和小胶质细胞中表达,并在这些细胞的活化过程中表达升高。
本抗体以合成的的Iba1羧基末端序列为抗原,该序列是人,大鼠和小鼠Iba1蛋白质保守序列。本抗体(免疫组化用)特异性与小胶质细胞/巨噬细胞反应,免疫双重染色与单克隆抗体结合,可与GFAP单克隆抗体((胶质纤维酸性蛋白,GlialFibrillaryAcidicProtein)联合使用对脑组织和细胞培养物进行双重染色。
特点
S特异性检测小胶质细胞与/巨噬细胞,不与神经细胞与星形胶质细胞发生交叉反应。可与人,大鼠,小鼠的Iba1反应
Wako |
016-26721 |
AntiIba1,MonoclonalAntibody(NCNP24) |
forImmunochemistry |
50ul |
Wako |
012-26723 |
AntiIba1,MonoclonalAntibody(NCNP24) |
forImmunochemistry |
10ul |
Wako |
013-26471 |
AntiIba1,Rabbit,RedFluorochrome(635)-conjugated |
forImmunochemistry |
100ul |
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(结合红色荧光素635) |
Wako |
016-26461 |
AntiIba1,Rabbit,Biotin-conjugated |
forImmunochemistry |
100ul |
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(结合生物素) |
Wako |
019-19741 |
AntiIba1,Rabbit(forImmunocytochemistry) |
forImmunochemistry |
50μg |
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(免疫组化) |
Wako |
016-20001 |
AntiIba1,Rabbit(forWesternBlotting) |
forImmunochemistry |
50μg |
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(免疫印迹) |
应用
石蜡切片应用方法:
1.固定
2.用0.01MPBS缓冲液清洗二次
3.使用含有0.3%过氧化氢的甲醇孵育30分钟
4.用0.01MPBS缓冲液清洗三次
5.使用封闭液(含有1.5%的山羊血清和1%BSA的0.001MPBS缓冲液)室温孵育2小时
6.使用含有AntiIba1polyclonalantibody的封闭液4℃孵育过夜
7.用0.01MPBS缓冲液清洗三次
8.使用含有生物素标记的抗兔IgG(1:200)的封闭液室温孵育1小时
9.用0.01MPBS缓冲液清洗三次
10.使用EliteABC试剂(含有试剂A1:50,试剂B1:50的0.01MPBS溶液)
11.用0.01MPBS缓冲液清洗三次
12.过氧化物酶溶液(含有0.01%过氧化氢和0.05%DAB的0.05MTris溶液)
巨噬细胞/小胶质细胞特异性蛋白抗体Iba1的应用
免疫细胞化学⇒和光 Cat. No. 019-19741 (50μg (100μL))
说明书下载地址
http://www.siyaku.com/uh/Flh.do?file_path=/ANTI_FILES/W01/W01W0101-1974/D0010.pdf&now=1481080836480
免疫印迹⇒和光Cat. No. 016-20001 (50μg (100μL))
众所周知,钙离子是中枢神经系统细胞信号传递的重要介质。钙离子通过与各种钙结合蛋白关联激活信号,其中大多数蛋白属于EF手性蛋白家族。
Iba1属于17-kDa EF蛋白,在巨噬细胞和小胶质细胞中特异性表达,起到正向调节的作用。
和光提供的兔多抗可识别Iba1羧基末端序列的合成肽,这段Iba1蛋白序列在人、大鼠和小鼠中均存在。这些抗体可特异性的识别小胶质细胞和巨噬细胞,适用于脑组织的双重免疫染色,以及细胞培养中与GFAP单抗联合使用(GFAP单抗可特异性的识别星形胶质细胞)。
特征:特异性识别人、大鼠、小鼠的小胶质细胞及巨噬细胞,无法作用于神经元和星形胶质细胞。
大鼠原代的细胞培养的双重免疫染色和同一位置的对比图像
绿色:Iba1,小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体作用 (Wako Cat. #019-19741)
红色:星形胶质细胞,与GFAP单抗作用
(此数据由 日本神经系统科学国家研究所神经化学部提供)
Iba1抗体用于免疫细胞化学(Wako Cat. #019-19741)试验过程
石蜡切片应用
1)去石蜡
100%二甲苯 10分钟 2次
100%乙醇 5分钟 2次
80%乙醇 5分钟
70%乙醇 5分钟
一蒸馏水 5分钟 2次
2)用0.01M缓冲液冲洗两次;
3)在含0.3%过氧化氢的甲醇里孵育30分钟;
4))用0.01M缓冲液冲洗三次;
5)在室温下,放进含有1.5%山羊血清和1%牛血清蛋白的0.001MPBS的封闭液里孵育2小时;
6)在4度下,与 Anti Iba1 Antibody (0.5 μg/mL)(Wako Catalog No. 019‐19741)在封闭液中孵育过夜;
7)用0.01M PBS冲洗3次;
8)在室温下,与生物素标记的anti‐Rabbit IgG Antibody (1:200)在封闭液中孵育1小时;
9)用0.01M PBS冲洗3次;
10)在室温下,与ABC试剂(试剂A(1:50)和试剂B(1:50)与0.01MPBS混匀)孵育1小时
11)用0.01MPBS冲洗3次;
12)在过氧化物酶溶液(含0.01%过氧化氢,0.05%DAB的0.05MTris缓冲液)中孵育;
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