货品编号: Biotium.41003
品牌: Biotium
品名: GelRed
规格: 0.5mL
Super GelRed(10,000×水溶液)中文说明书 Super GelRed是一种高灵敏、低毒性和超安全的荧光核酸凝胶染色试剂。它可替代溴化乙锭(EtBr,EB),并且远高于EB的灵敏度,同时不需要脱色。 由于Super GelRed和EB有相同的光谱特性,因此用它替代EB时不需要更换成像系统。
产品特点: 无毒性:Super GelRed独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验结果也表明,该染料的诱变性远小于EB。 其水溶染色剂通过美国环保局安全认定,废弃物可直接倒入下水道,而不会造成任何环境污染。 灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。 稳定性高:适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。 操作简单:EB一样,与在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗,即可直接用紫外凝胶透射仪观察。 适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶 或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于dsDNA、ssDNA或RNA染色。 与EB有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置: 标准的EB滤光片或SYBR滤光片都适用,使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可,在300nm紫外光附近可得到最佳激发。但是Super GelRed不能被488nm氩离子激光器或相似波长的可见光完全激发,因此不推荐使用此类激发装置的成像系统。
使用方法: 1.胶染法(用法同EB) (1)制胶时加入Super GelRed核酸染料(例如:每50mL琼脂糖溶液中加入5μL Super GelRed 10,000×储液,以此比例类推)。 (2)按照常规方法进行电泳。 注意事项: 此方法染色染料用量相对较少,500μL染料大约可以做100块50mL的胶。 由于Super GelRed具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。
也可以选择将Super GelRed储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。Super GelRed兼容所有
常用的电泳缓冲溶液。含有染料的预制凝胶溶液可以大量制备,并长期保存直到使用。 此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
2.泡染法 (1)按照常规方法进行电泳。 (2)用H2O将Super GelRed 10,000×储液稀释约3,300倍到0.1M NaCl中,制成3×染色液。(例如将15μL Super GelRed 10,000×储液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。 (3)将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右,最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同 而略有不同。对于含3.5~10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30min到1h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。 注意事项: 用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。 3×Super GelRed染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。 注:1、如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。 2、如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度、选用更长的凝胶、延长凝胶时间以保证边缘清晰、改进上样技巧或选择泡染法染色。
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