Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法
英文名:Phos-tag™Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution
产 地:日本
商 家:Wako(和光纯药工业株式会社)
wao Phos-tag™实验设计
◆ 研究领域
磷酸化蛋白和磷酸化多肽的研究
◆ Phos-tag
TM的简介
Phos-tag
TM(Phosphate-binding tag)是由日本广岛大学的Kinoshita等研制的磷酸化蛋白蛋白捕获分子。Phos-tag
TM螯合Zn2+或者Mn2+等重金属离子后形成一个半封闭的空间。在pH值6~8的中性条件下,该空间恰好能容纳一个磷酸基团,使得螯合有金属离子的Phos-tag
TM分子能够与磷酸基团牢固而稳定的结合。可以特异性结合所有氨基酸的磷酸化基团,广泛运用于细菌,酵母,昆虫等物种研究。
◆ Phos-tag
TM系列产品
利用螯合有金属离子的Phos-tag
TM可以特异性结合磷酸化基团的特点,研发了Phos-tag
TM系列产品,运用于常见的蛋白实验,比如SDS-PAGE,免疫印迹,亲和层析,质谱等。
Phos-tagTM系列产品 |
产品描述 |
用途 |
具体运用实验 |
Phos-tagTM Acrylamide |
Phos-tagTM与丙烯酰胺(Acrylamide,SDS-PAGE分离胶主要成分)结合 |
分离磷酸化和非磷酸化蛋白。SDS-PAGE分离胶制备中添加金属离子(Zn2+或者Mn2+)和Phos-tagTMAcrylamide。在蛋白电泳过程中,磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTMAcrylamide发生特异性结合,导致磷酸化蛋白的迁移速度变慢。 |
SDS-PAGE(单一蛋白)
免疫印迹(多种蛋白混合液,例如细胞裂解液,组织均浆液,体外激酶反应体系。使用目的蛋白的非磷酸化抗体作为一抗) |
Phos-tagTMBiotin |
Phos-tagTM与生物素(Biotin)结合 |
可与亲和素标记的HRP结合,检测磷酸化蛋白。 |
免疫印迹(正常SDS-PAGE) |
Phos-tagTMAgarose |
Phos-tagTM与琼脂糖(Agarose)结合 |
利用磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTMAgarose特异性结合,纯化磷酸化蛋白。 |
亲和层析法 |
Phos-tagTMMass Analytical kit |
Phos-tagTM与不同荷质比的Zn结合 |
检测微量磷酸化蛋白和磷酸化多肽。 |
质谱实验 |
备注:除Phos-tagTMMass Analytical kit之外,其他Phos-tagTM系列产品都需要配置金属离子溶液。
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