印度HiMedia 维生素B12测定用培养基


印度HiMedia 维生素B12测定用培养基

乳酸杆菌生长需要特别的营养,因而在非选择性培养基上很难生长。维生素测定用培养基用于维生素的微生物法测定。该方法需要三种培养基:即维持培养基,用于保持菌种活力;接种培养基,用于测试菌液的制备;测定用培养基,用于待测维生素的定量。

货品名称:维生素B12测定用培养基

英文名:Vitamin B12 Assay Medium

 

货号:M036

 

品牌:印度HiMedia

 

用途:维生素B12的微生物法测定

 

原理

乳酸杆菌生长需要特别的营养,因而在非选择性培养基上很难生长。维生素测定用培养基用于维生素的微生物法测定。该方法需要三种培养基:即维持培养基,用于保持菌种活力;接种培养基,用于测试菌液的制备;测定用培养基,用于待测维生素的定量。

 

维生素B12测定用培养基,不含维生素B12,但包含所有其他维生素和必要养分,用于莱士曼乳酸杆菌(ATCC 7830)的生长。莱士曼乳酸杆菌(ATCC7830)作为测定用菌,最早由Capp等人描述(1)并被美国药典和美国分析化学家协会(AOAC)所推荐(2,3)。

 

应用

维生素B12测定用培养基推荐采用莱士曼氏乳酸杆菌(ATCC 7830)作为测定用菌,进行维生素B12的微生物法测定。

 

配置

称取8.45g干粉培养基溶于100ml蒸馏水,必要时加热使培养基完全溶解。混匀,使轻微的沉淀均匀分布。测定时,分装试管,每管为5ml培养基(包含标准品和待测样品)。加蒸馏水,使总体积达到10ml。高压消毒15磅121°C 5分钟。立即冷却培养基。每个试管(10 ml)的维生素B12水平为0、0.025、0.05、0.075、0.1、0.125、0.15、0.2 ng时,均可获得满意结果。

 

培养反应

进行微生物法测定维生素B12。采用莱士曼氏乳酸杆菌(ATCC7830),35-37°C孵育18-24小时。

 

生长状况

随着测定管标准品水平升高,(美国药典维生素B12标准水平,0,0.025,0.050,0.075,0.1,0.125,0.150,0.2ng),目标菌生长逐渐递增,伴随着620nm处吸光度的增加。 

 

参考文献

1.  Capps B. E., Hobbs M. H. H. and Fox S. H.,1949, J. Biol. Chem., 178:517.

2. The UnitedStates Pharmacopoeia, 2006, USP29/NF24, The United States PharmacopeialConvention, Rockville, MD.

3.  H. Williams, (Ed.), 2005, Official Methods of Analysisof the Association of Official Analytical Chemists, 19th Ed., AOAC,Washington,D.C


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