原代肝癌条件重编程培养基

简要描述：原代肝癌条件重编程培养基（Human Hepatocarcinoma Conditional Reprogramming Medium）是一种为促进肝癌原代细胞体外生长而设计的*培养基。

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产品名称：原代肝癌条件重编程培养基（Human Hepatocarcinoma Conditional Reprogramming Medium）产品说明：原代肝癌条件重编程培养基（Human Hepatocarcinoma Conditional Reprogramming Medium）是一种为促进肝癌原代细胞体外生长而设计的*培养基。它是一种无菌的液体混合系统，含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质等。培养基基于碳酸氢盐的缓冲体系，在5%CO₂/95%空气的培养箱中平衡时，pH值为7.4。该培养基的配方可以提供一个理想平衡的营养环境，选择性地促进体外人肝癌原代细胞的生长。产品优势：(1) 培养成功率高

(2) 体外持续扩增

(3) 保持肿瘤原始病理特征

(4) 药敏结果宇临床数据接近使用说明◉使用前准备(1) 15mL无菌离心管、移液器、移液管、无菌枪头等表面消毒后放入生物安全柜中紫外照射30 min(2)提前30min从4 ℃冰箱取出原代细胞培养基平衡至室温。(3)γ 射线照射过的NIH-3T3细胞（40 Gy辐照）。◉肝癌原代上皮细胞培养（1）获取的人源肝癌原代细胞，按照表1中细胞数接种在合适的培养器皿中，加入y射线辐照后的NIH-3T3细胞（添加滋养细胞数量如表1和表2所示）。（2）原代细胞初次接种后2-3天勿动（利于细胞贴壁），培养过程中若培养基颜色变黄但细胞未长满时可进行半换液，镜下观察细胞未长满但3T3细胞已不足时，适量补充γ射线辐照后的3T3细胞（一般补加初始数目的一半）。◉肝癌原代上皮传代（1）镜下观察细胞形成克隆，且汇合度85~95%时即可传代。（2）培养箱中取出细胞，弃旧培养液，0.05%胰酶洗涤5秒后吸尽，再加入适量0.05%胰酶，37℃孵育，2~5 min后拿出轻拍培养瓶/板侧面，显微镜下观察细胞消化情况。（3）细胞消化至细胞变圆并开始脱落时用原代细胞终止培养基终止消化，并将细胞转移至离心管中，1500 rpm,3min。（4）弃上清，以1~5mL相对应的原代细胞培养基重悬细胞，活细胞计数，将细胞悬液按适合的细胞密度接种于培养瓶/板，加入γ射线辐照后的NIH-3T3细胞（不同规格培养瓶/板底面积、接种原代细胞数量、添加滋养细胞数量如表1、表2所示），补加肠癌培养基至所需体积，十字交叉混匀，培养容器75%表面消毒后置培养箱，37℃、5%CO₂条件培养。其他步骤同上。注意事项：1.本产品在使用前需平衡至室温。2.使用产品时应注意无菌操作，避免污染。3.本产品中含有原代细胞专用抗生素，如无特别需要不用额外再添加双抗，可直接使用。4.为保持本产品的理想使用效果，不宜将其过夜放置于室温或较高的温度环境中。5.请于保质期内使用本产品，超出保质期，必须放弃使用。6.本产品仅用于科研用途，不能用于体外诊断。