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EZBioscience 4× EZscript Reverse Transcriptio

简要描述:EZBioscience 4× EZscript Reverse Transcription Mix II为包含去除基因组DNA的高效DNase的新一代快速逆转录试剂盒,与上一代产品相比具有更高的逆转录效率。本试剂盒采用的新型M-MLV突变体逆转录酶具有很强的抗干扰能力及扩增能力,扩增效率尤佳,同时采用了最新优化的反应体系,进一步提高了逆转录效率。

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一、试剂盒简介

EZBioscience 4× EZscript Reverse Transcription Mix II为包含去除基因组DNA的高效DNase的新一代快速逆转录试剂盒,与上一代产品相比具有更高的逆转录效率。试剂盒中主要包含4管成分:qDNARemover中主要包括浓缩的DNase及Buffer;4xEZscript RT MixlI中主要包含了逆转录所需的除引物以外的所有成分(逆转录酶、buffer、RNase Inhibitor、dNTPs等),OligodT18、Random Hexamer为独立包装,便于添加目标片段特异性引物(如microRNAIncRNAcircRNA等的特异性引物)。

EZBioscience 4× EZscript Reverse Transcription Mix II采用的DNase及Buffer反应系统经过特殊的优化,仅需室温(25℃)反应5分钟,就能降解95%以上的基因组 DNA,极大的降低了可能残留的基因组对结果的干扰。

本试剂盒采用的新型M-MLV突变体逆转录酶具有很强的抗干扰能力及扩增能力,扩增效率尤佳,同时采用了最新优化的反应体系,进一步提高了逆转录效率。使用本试剂盒逆转录15分钟得到的扩增产物量可以达到AMV逆转录酶大约1h的产物量(Ct值相同)。后续逆转录产物建议用于PCR、gPCR、基因克隆等实验。

二、产品组分

*1:包括逆转录酶、buffer、RNase Inhibitor、dNTP Mixture等组分。

三、保存条件

建议置于-20℃保存

四、试剂盒特点

1、本试剂盒为预先温好的4xEZscriptRT Mix,只需加入模板RNA和水温匀后便可以开始反应;使用了新一代逆转录酶,具有更强的酶活性和更高的灵敏度。

2、含有去除基因组DNA的qDNA Remover,只需室温5分钟即可去除基因组DNA

3、只需42℃、15分钟即可高效合成荧光定量PCR所需的高质量cDNA模板,是进行荧光定量PCR反应的理想试剂。

4、含有Oliqo(dT)18和Random Hexamer两种反转录引物,可根据实际情况区别使用。反转录反应可使用Oligo(dT)18引物或者Random Hexamer引物,也可以Oliao(dT)18和Random Hexamer两种引物后时使里,具扩增一种目的基因时,也。以使用Specific Primer作为反转录引物。

五、注意事项

1、当同时需要进行数次反应时,应先配制各种试剂的混合液,然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。

2 4xRT Master Mix在使田前重Vortex振荡浪匀,轻轻离心后使用 由干酶保存液中含有50%的日油 粘度高 分取时

应慢慢吸取。同时,要使用精确、量程适合的移液枪,并且不要使Tip插入液面过深,否则会因Tip壁粘着造成损失,而使酶

量不足。

3、分装试剂时务必使用新的枪头(Tip),以防止样品间污染。

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