细胞培养过程中,培养基的颜色变化往往对应着细胞状态,那么你知道DMEM培养基为什么是红色的吗?让我们一起来看看吧!
在细胞生长过程中,由于细胞释放的代谢物改变了pH值,培养基的颜色也随之改变。大多数情况下,DMEM培养基都呈红色,这是因为DMEM细胞培养基的PH值大多在7.4左右。不同成分培养基的颜色会有差异,DMEM培养基会比1640颜色深一点,主要是DMEM里面的酚红含量比1640多导致。在较低的pH值下,酚红会变成中黄色,而在较高的pH值下,它会变成中紫色。对于大多数培养体系(pH为7.2 ~ 7.4),培养基应为鲜红色。
很多时候,DMEM培养基颜色并不是我们所见的红色,而是偏紫或偏黄,不同颜色培养基究竟对应何种细胞状态呢?
一、培养基颜色偏红或者紫
开封了一段时间后的DMEM培养基,颜色会比正常深很多。主要是因为DMEM培养基所用的缓冲体系为NaHCO3,培养基开封后NaHCO3会分解成CO2溢出,导致培养基偏碱;可以将培养瓶拧松放置于CO2培养箱中一段时间后,培养基颜色会变正常。
二、颜色变深的DMEM培养基能不能继续使用?
部分细胞能够很快适应培养基的这种PH值波动,放入培养箱后可以正常生长;也有极少数的细胞会比较敏感,造成细胞漂浮过多等情况,如BV2细胞会就比较敏感,可能出现漂浮增多的情况。
三、培养基颜色变黄
通常DMEM培养基里的酚红指示剂遇酸会变黄,但也有可能是细胞被污染而导致的DMEM培养基颜色变黄,以下为几种常见情况:
1.由于细胞代谢产酸,培养了细胞后的培养基会从红变黄,如果培养基是橘黄色,则是细胞健康生长的颜色,无须担心,继续培养即可。
2. 若细胞状态良好,但换液后培养基颜色变黄快,则可能是因为细胞密度大或消耗过大,提示需要传代了。
3. 若细胞状态差,生长异常,培养基很快变黄,变浑浊,镜下观察有较多小颗粒物,则有可能是细菌污染或支原体污染。轻度污染可用抗生素清洗处理或使用支原体清除试剂,重度污染建议消杀后丢弃。
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