Meridian可冻干粪便直扩qPCR /RT-qPCR预混液(MDX142/MDX143)


迈迪安可冻干粪便直扩qPCR/RT-qPCR预混液中含有优化的添加剂,对粪便样本中存在的抑制物有更强的耐受性,同时可保持病人样本的质量和完整性。该试剂可以兼容各种冻干条件,通过通过干燥开发常温稳定的检测。其即用型的优化配方,可以减少额外的优化步骤,只需要加入特异性引物探针即可。

Lyo-Ready™ 可冻干粪便直扩qPCR /RT-qPCR 预混液是不含甘油、4x浓度、含有冻干赋形剂的优化配方,适用于从粪便样本中直接进行灵敏地DNA 或RNA检测。能够简化粪便DNA/RNA检测的研发,缩短样本处理检测周转时间,简化粪便DNA/RNA检测的研发,可兼容冻干,常温下保质期更长,减少冷链储运成本。

适用于液体或者冻干体系——扩增效率不受任何影响

A) 使用可冻干粪便直扩qPCR预混液(MDX142)对20%人工粪便样本中10倍连续稀释的DNA样本(分别为10,000,1,000, 100 和10个拷贝) 直接扩增

B) 使用可冻干粪便直扩RT-qPCR预混液(MDX143)对5%人工粪便样本中10倍连续稀释的RNA样本(分别为10,000,1,000, 100 和10个拷贝) 直接扩增对比液体体系(蓝色)和冻干干燥后的体系(红色),结果显示冻干体系具有和液体体系相同的灵敏度和可重复性

在标准和快速反应循环设置下的高效性能——检测更灵活、周转时间更短

使用可冻干粪便直扩qPCR预混液(MDX142)对6.6 mg/mL人体粪便中的两个哺乳动物DNA靶标(红色)进行扩增。反应在QuantstudioTM 7 Flex Real-Time PCR仪上,分别使用标准循环和快速循环两种设置进行。结果显示,在标准和快速循环的扩增条件下,可冻干粪便直扩qPCR预混液都有相同的扩增效率和荧光强度,检测的灵敏度和可重现性均保持一致。

标准循环:95°C 3分钟,95°C 10秒,60°C 30秒,40个循环;

快速循环:95°C 3分钟,95°C 1秒, 60 °C 1秒,40个循环。

冻后常温稳定性长达12个月以上

将可冻干粪便直扩qPCR/RT-qPCR预混液干燥后进行加速热稳定性实验。试剂干燥后(红色)在 37 C 保存4周,与新鲜液体试剂(蓝色)进行对比: (A) 20%粪便样本的 qPCR检测 (B) 5%粪便样本的RT-qPCR检测。结果显示,冻干后试剂与液体试剂具有一致的活性 (<0.5 ΔCt)。冻干后试剂在常温下可保持稳定性至少12个月以上。

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