免疫组化双染技术是常用的免疫组化方法之一，它可以通过使用两种不同种属的一抗、两种不同种属的二抗系统和不同颜色的显色系统，同时检测组织切片中两种或多种抗原的表达情况。那么，目前常用的双染显色系统有什么呢？让我们一起来看看吧！

一、辣根过氧化物酶(HRP)检测系统

辣根过氧化物酶（HRP）是一种能将过氧化氢（H2O2）分解为氧气（O2）和水（H2O）的过氧化物酶。HRP可以使用DAB作为氢供体，H2O2作为底物，最终产生棕黄色的抗原-抗体结合的产物。

二、碱性磷酸酶(AP)检测系统

DAB在临床应用中也有局限性。当内源性过氧化物酶活性较高或黑色素含量较高时，DAB不是最jia选择，应采用其他显色剂或碱性磷酸酶。例如，在黑色素瘤的免疫组化诊断中，DAB显示的棕色沉淀物与黑色素瘤表达的HMB45（或S-100）在颜色上难以区分。如果黑色素颗粒较多，很难判断结果。因此，在富含黑色素的肿瘤中，使用红色着色剂有助于更清楚地确定阳性染色。AP系统使用固体红、固体蓝或BCIP/NBT作为着色剂。固红染色阳性结果为红色，固蓝、BCIP/NBT为蓝色。

AP

AP催化固体红显色反应，将萘酚AS-MX磷酸水解为萘酚。萘酚与固体红发生偶联反应，在AP活性中心形成红色不溶性沉淀。苏木精免疫组化染色时，双染色系统固定效果较好。一是结合牢固，二是易于与DAB和苏木精鉴别。

免疫组化双染技术的结果须建立在对阳性对照切片、阴性对照切片成立的基础上，进行染色结果的判读。更多有关免疫组化双染显色系统的相关产品，请联系金山科研平台：微信jinshanbio