细胞转染常用的转染试剂很多，其中，Lipo3000深受广大科研工作者的喜爱，那我们来看看Lipo3000细胞转染的实验步骤及注意事项吧！

一、实验前准备

Lipofectamine™ 3000转染试剂（Thermo Fisher）、Opti-MEM（可以用无血清的培养基代替）

二、实验步骤

1.接种细胞，使其在转染时达到70–90%汇合度。

注：对于HEK293，6孔板一般铺50万个细胞左右。对于PC9, 24孔板一般铺5-10万个细胞。由于不同细胞，生长状况不太一样，需要根据情况调整。

2.使用Opti-MEM™培养基稀释Lipofectamine™ 3000试 剂，充分混匀。

3.使用Opti-MEM™培养基稀释DNA，制备DNA预混液，然后添加P3000™试剂，充分混匀。

4.将上面两步溶液合在一起，混匀并孵育10-15mins。

5.将混匀后的溶液加入到细胞培养基中，并轻轻摇晃培养基，使其均匀。

6.37°C孵育细胞2–4天，然后分析转染细胞。

转染量：