RD蛋白的生物活性如何测量?


RD蛋白的单位是以小瓶(µg或mg)的方式出售,具有特定的活性范围。那RD蛋白的生物活性如何测量?

使用生物测定法,例如趋化性或细胞增殖测定法、酶测定法或功能ELISA,常规测量重组蛋白的生物活性。由于蛋白质具有发挥多种生物活性的能力,对于特定蛋白质可能存在几种可接受的生物测定,并且几种不同的细胞类型可能会做出反应。不同的细胞类型对特定蛋白质具有不同的敏感性。因此,蛋白质的活性与细胞类型以及所采用的生物测定有关。

下图表明,需要不同浓度的重组小鼠IL-6来诱导两种不同细胞类型的增殖。在生物测定中引发50%最大反应所需的蛋白质质量称为ED50。在这两种常用的小鼠IL-6测定中,B9杂交瘤细胞系比T1165.85.2.1浆细胞瘤细胞系的灵敏度高约100倍。因此,相同质量的IL-6可以被分配为两个不同的活性单位。

每一批新的蛋白质和每一组新的实验条件都应该在滴定(剂量反应)实验中进行测试。这需要在建立新的实验或使用新的蛋白质批次或来源时进行。

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