抗原(antigen)是指能够引起体内抗体生成的物质,是外来的可诱发免疫反应的物质。抗原可经过B细胞上的免疫球蛋白的辨识或者经抗原呈现细胞的处理,与主要组织相容性复合体结合成复合物后,将T细胞活化,进而引发连续的免疫反应。
抗体(antibody)是指由于抗原的刺激,在体内产生的具有保护机体作用的蛋白质。由浆细胞(效应B细胞)分泌,用来中和与鉴别外来物质如病毒、细菌等。大部分抗体存在于脊椎动物的血液等体液中,还有的存在于B细胞的细胞膜表面。抗体是免疫蛋白质,与抗原特异性结合,在宿主对细菌、病毒、真菌等感染性病原体的防御中发挥着作用。抗体呈Y型,其免疫功能是由它与抗原的结合能力决定的,抗原则是由细胞释放的或在细胞上发现的刺激免疫应答反应的分子。
抗体除在宿主免疫中发挥作用外,也广泛应用于医学研究和治疗方面。包括两种类型的抗体——多克隆抗体和单克隆抗体。
一、多克隆抗体
1. 定义:多克隆抗体(polyclonal antibody, pAb)由多种抗原决定簇刺激机体,则产生出各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混合在一起就是多克隆抗体。也就是说,多克隆抗体就是用一种包含多种抗原决定簇的抗原刺激机体的多个B细胞分泌所产生的针对于多种抗原表位的不同抗体的混合物。所获得的免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物。
2. 制备方式:多克隆抗体由抗原免疫动物后,从动物的血清中纯化获得。
3. 多克隆抗体制备技术路线
特异性:多克隆抗体实际上是许多单克隆抗体的集合,它们的特异性参差不齐,基本符合正态分布曲线,总体表现为处于统计学正态曲线中位线(MID)的水平。
交叉反应:多克隆抗体由于针对目标抗原的多个抗原表位,特异性低,具有生物多样性,因此存在有相同或相似的抗原表位几率高,出现交叉反应的几率也就较高。
二、单克隆抗体
1. 定义:由单一的B细胞经过克隆产生的特异性强、高度均一的抗体。
2. 制备方式:单克隆抗体由抗原免疫动物后,B淋巴细胞与无限增殖的骨髓瘤细胞相融合,筛选出单克隆的杂交瘤细胞,通过ELISA实验筛选出能产高效价抗体的单克隆杂交瘤细胞,通过培养单克隆杂交瘤细胞即可生产与抗原特异性结合的单克隆抗体。
3. 特异性:单抗制备的后续筛选过程,可以去除大部分的非特异抗体,保留几株特异性较好的单克隆抗体,因此单克隆抗体具有更高的特异性。
4. 交叉反应:单克隆抗体具有极gao的特异性,因此存在有相同或相似的抗原表位几率很低,进而出现交叉反应的几率也低。
三、单克隆抗体和多克隆抗体的区别
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