醛基活化琼脂糖基质在制备和使用定制亲和色谱填料方面具有良好的记录。将生物特异性配体与醛基活化琼脂糖偶联是一项成功且有据可查的技术。
醛基活化琼脂糖色谱填料(Aldehyde-activated SepFast)通过还原胺化反应与含有伯胺基团的配体形成化学稳定的仲胺键。这种预活化的琼脂糖基质可用于亲和色谱填料的定制,适用于小规模和大规模纯化应用。
1.属性
有2种基质可供选择,适合各种待偶联或纯化的分子。
• 醛基活化琼脂糖色谱填料(Aldehyde-activated SepFast 4 High Flow)由高度交联的4%珠状琼脂糖组成。其大孔径适用于偶联或纯化大分子。它具有高机械刚度,可在降低背压的情况下实现高流量。
• 醛基活化琼脂糖色谱填料(Aldehyde-activated SepFast 6 High Flow)由高度交联的6%珠状琼脂糖组成。其适中的孔径适用于偶联较小的分子。它也具有高机械刚度,可在降低背压的情况下实现高流量。
由于琼脂糖具有出色的亲水性和低非特异性结合特性,长期以来一直用于色谱分离。这些颗粒具有开孔结构,对各种分子具有出色的传质性能。基质通过氧化被激活以产生醛基,它直接与分子中的伯胺基反应,在还原剂存在的情况下被固定化。
醛基活化琼脂糖色谱填料(Aldehyde-activated SepFast)以20%乙醇中的水悬浮液形式提供。
表1 醛基活化琼脂糖色谱填料(Aldehyde-activated SepFast)的特性
可耦联基团 | -NH2 |
基质 | SepFast 4HF:高度交联的4%琼脂糖 SepFast 6HF:高度交联的6%琼脂糖 |
粒径 | 50-150 μm |
活化水平 | > 5 μmol aldehyde /ml medium |
pH稳定性 | 3-13(具有配体依赖性) |
化学稳定性 | 对偶联配体能够接受的所有常用的水性化学品稳定 |
保存 | 4℃-8℃ |
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