siRNA转染


siRNA转染

1.siRNA导入细胞的方法

siRNA导入细胞的方法有化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术等。技术的选择要考虑转入时细胞的承受能力、细胞对病毒感染的敏感性、细胞生长特性等实验条件的限制。对于贴壁细胞来讲化学转染技术比较合适,而对于悬浮细胞,电穿孔更有效。

2.转染试剂的选择

在选择转染试剂时,首先考虑的是特定的细胞株,而不是被导入细胞中的物质。在试剂的选择上建议选择线性PEI转染试剂。

3.筛选转染试剂

好的转染试剂有以下特点:如下表

特性

程度

实例

毒性

对细胞的毒性小。

转染率

在siRNA转染过程中有较高成功率

导入效果

准确

在mRNA水平检测siRNA导入的效果比用看家基因的siRNA阳性对照检测更准确。

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