RNA干扰(基因沉默)


项目内容概述RNA干扰(RNAi,RNA Interference)是抵御外来病毒侵犯的一种防御机制,广泛应用于功能基因组学、基因治疗、靶药物筛选、细胞信号通路分析、蛋白质互作等领域。具体来说,当dsRNA或pre-miRNA进入细胞后,能够被特异的核酸内切酶(Dicer)识别并切割成为很小的片段,这些片段在解旋酶的作用下会解链。反义链在与体内一些酶结合形成RNA诱导的沉默复合物(RNA-Induced Silencing Complex,RISC),RISC与mRNA同源区进行特异性结合,若miRNA与mRNA的结合位点能够*配对,则会切割mRNA;若miRNA与mRNA的结合位点不能够*配对,则会抑制mRNA的翻译过程。目前实验中主要采用miRNA、 shRNA 和siRNA 3种RNA干扰方法。shRNA是利用人源或鼠源的RNA聚合酶III(pol III)启动子,对编码短干扰RNA(siRNA)的DNA序列进行转录来实现RNA干扰。转录后的shRNA经加工,参与RISC的形成。与人工合成的siRNA相比,shRNA可以在较长时间内有效抑制细胞内靶基因的表达。miRNA是一类可以通过RNAi机制调节基因表达的内源性小RNA,人工miRNA与shRNA的设计原理基本相同,由于miRNA具有内源性,因此其更易产生有效的基因沉默。我们拥有一系列shRNA/miRNA表达载体以及Sponge载体,同时提供包括shRNA/miRNA设计、慢病毒包装、阳性克隆鉴定、单克隆培养、基因沉默细胞系构建等一系列实验服务内容。

实验流程1、细胞预实验。2、慢病毒载体构建。3、shRNA/miRNA功能验证。4、慢病毒包装。5、RNAi细胞系构建。6、沉默效果检测。

我们的优势1、提供各种实验材料和仪器,满足项目课题实验需要。2、专业的操作人员。3、高规格实验室。4、数据结果交付周期快。5、完善的服务体系,全程跟进,确保满意。服务流程1、提交项目课题相关需求和资料。2、与我们的专业技术团队讨论项目细节。3、根据讨论后的意见对实验方案进行修改。4、双方均满意并达成一致,签订技术服务合同。5、开展实验,按期完成合同规定的内容。6、结题,提供实验原始结果和分析结果、实验流程、实验条件等等。咨询与订购感谢您选择我们的服务,如果您有任何问题,请联系我们,我们将竭诚为您解答和服务。

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