英文名称：In Situ Cell Death Detection Kit, Fluorescein

中文名称：原位细胞凋亡检测试剂盒, 荧光素标记

原位细胞凋亡检测试剂盒 产品介绍：

原们细胞凋亡检测试剂盒广泛应用于检测细胞凋亡，包括利用琼脂糖凝胶电泳的基因组DNA分析和基于3H-胸腺嘧啶或5-溴-2’-脱氧尿嘧啶的DNA断裂分析。这种方法涉及DNA片断分离，从给定细胞群的高分子量DNA中分离出低分子量DNA。因此，这些方法不能提供给定细胞群或组织切片中单个细胞命运的相关信息。鉴于此，个别凋亡细胞可放于显微镜下观察，由于其发生凋亡时表现出核染色质皱缩和破碎的独特现象。但这种方法主观性强，受限于在相对较短时间窗内观察（当细胞形态变化太大时）。细胞凋亡早期标志是核DNA连接区域的选择性降解。DNA裂解将促使双链或单链DNA破裂。两种类型断裂都可用游离3’-OH末端标记的修饰核苷酸（比如，生物素-dUTP, 地高辛-dUTP, 荧光素-dUTP）在酶促反应中检测到。末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）催化脱氧核糖核苷酸独立聚合为以3’-端结尾的单链和双链DNA。这种方法被称为TUNEL （TdT介导的dUTP-X 缺口末端标记）。游离3’-OH也可利用DNA聚合酶标记（模板依赖型的缺口平移）。但是，TUNEL方法更灵敏快速。

» 样本材料：悬浮细胞，细胞离心涂片器和细胞涂片制备，玻片上生长的贴壁细胞，冷冻和蜡包被的组织切片。

» 检测原理：原位细胞凋亡检测试剂盒基于对细胞凋亡早期发生的单链和双链DNA断裂的检测。凋亡细胞被固定和渗透。随后，这些细胞和TUNEL反应混合物（包含TdT和荧光素-dUTP）一起孵育。孵育期间，TdT催化荧光素-dUTP标记的游离3’-OH添加到单链和双链DNA中。清洗后，标记物包含在DNA断裂位点处，用流式细胞仪和/或荧光显微镜可观察到。

» 产品成份：酶溶液（TdT）& 标记溶液（荧光素-dUTP）

» 产品应用：利用荧光显微镜在单细胞水平定性检测细胞凋亡，流式细胞仪定量检测调亡细胞

产品特性：

• 灵敏：直接用荧光素-dUTP标记降低了背景标记

• 快速：荧光素-dUTP标记在TUNEL反应结束后就可直接进行样本分析（1-2 h）

• 方便：不需要进行二次检测

• 精确：分子水平鉴定早期细胞凋亡（DNA链断裂）