英文名称：In Situ Cell Death Detection Kit, AP

中文名称：原位细胞凋亡检测试剂盒, AP

原位细胞凋亡检测试剂盒, AP 产品介绍：

原位细胞凋亡检测试剂盒广泛应用于检测细胞凋亡，包括利用琼脂糖凝胶电泳的基因组DNA分析和基于3H-胸腺嘧啶或5-溴-2’-脱氧尿嘧啶的DNA断裂分析。细胞凋亡早期标志是核DNA连接区域的选择性降解。DNA裂解将促使双链或单链DNA断裂。两种类型断裂都可用游离3’-OH末端标记的修饰核苷酸（比如，生物素-dUTP, 地高辛-dUTP, 荧光素-dUTP）在酶促反应中检测到。末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）催化脱氧核糖核苷酸独立聚合为以3’-端结尾的单链和双链DNA。这种方法被称为TUNEL （TdT介导的dUTP-X 缺口末端标记）。游离3’-OH也可利用DNA聚合酶标记（模板依赖型的缺口平移）。但是，TUNEL方法更灵敏快速。

检测原理：原位细胞凋亡检测试剂盒基于对细胞凋亡早期发生的单链和双链DNA断裂的检测。凋亡细胞被固定和渗透。随后，这些细胞和TUNEL反应混合物（包含TdT和荧光素-dUTP）一起孵育。孵育期间，TdT催化荧光素-dUTP标记的游离3’-OH添加到单链和双链DNA中。清洗后，标记物包含在DNA断裂位点处，并被抗荧光素抗体结合物识别标记（报告酶碱性磷酸酶）。清洗去除未结合的酶配体，AP保留在免疫复合物中，可通过底物反应观察到。

样本材料：细胞离心涂片器和细胞涂片制备，载玻片上生长的贴壁细胞，冷冻和蜡包被的组织切片

产品特点：

灵敏：最大凋亡细胞标记强度（细胞染色），比缺口平移要高

快速：荧光素-dUTP标记使其在TUNEL反应结束后直接可进行样本分析（2-3 h）

方便：使用荧光素d-UTP直接标记法可在检测时确认TUNEL反应效率

准确：可在分子水平（DNA链断裂）鉴定极早期凋亡细胞

灵活：不包含底物；可选择不同染色方法

产品成份：

• 酶溶液（TdT）

• 标记溶液（荧光素-dUTP）

• 媒介物AP（抗-荧光素抗体-AP），即开可用