CleanNGS核酸提取磁珠DNA AND RNA CLEAN-UP FOR NEXT GENERATION SEQUENCING LIBRARY CONSTRUCTION
品牌:荷兰CleanNA
英文名称:CleanNGS Kit
中文名称:CleanNGS核酸纯化磁珠
用途:NGS文库/PCR产物纯化 DNA\RNA核酸片段筛选
货号:CNGS-0005/CNGS-0050/CNGS-0500
规格:5 mL/50 mL/500 mL
CleanNGS核酸提取磁珠与知名品牌AMPureXP操作规程和结果无明显差异,但价格更低。
CleanNGS磁珠可以通过调节磁珠和核酸样本体积比,轻松进行核酸片段筛选。
CleanNGS核酸提取磁珠优势:
1. 优异的缓冲体系,100bp以上扩增产物回收效率更高;
2. 有效去除dNTP、引物、引物二聚体、盐离子和其他杂质;
3. 可进行核酸大小筛选。
3. 磁珠磁含量更高,磁吸附时间更短;
4. 无RNA酶的生产过程确保能应用于各种RNA的提取操作;
5. 可配套自动化设备进行高通量产物纯化。
6. 与知名品牌AMPureXP操作规程和结果无明显差异,但价格更低。
CleanNGS核酸提取磁珠试剂盒使用羧化磁珠提取DNA、RNA,为新一代测序(NGS)流程提供了高效的纯化系统。CleanNGS试剂盒具有最大的灵活性,只要调节样品和CleanNGS磁珠的体积比,可以轻松进行核酸左侧,右侧或双侧大小筛选。
CleanNGS使DNA和/或RNA核酸片段根据其大小选择性地结合到磁珠上,同时根据化学性质去除盐,引物,引物二聚体和dNTP。提取的DNA和RNA使用水或低盐缓冲液洗脱磁珠,并且可以直接用于下游应用等。CleanNGS可以手动使用,也可以适用于您当前的液体处理工作站所用方法(例如Hamilton,Beckman,Agilent,Caliper,Perkin Elmer,Tecan和Eppendorf)。
应用:
CleanNGS系统提取的产物是用水洗脱的,可立即用于下游应用:
新一代测序文库、PCR产物纯化
基因组DNA提取、RNA提取
片段分析、微阵列、限制性酶纯化、克隆
CleanNGS DNA/RNA提取磁珠可配套的液体工作站:
Beckman FX, Beckman NX ,Hamilton Microlab Star,Hamilton StarLET,Xiril Neon Instruments,Caliper Sciclone,Thermo KingFisher BioSprint (Qiagen) Ambion MagMax 96,Perkin Elmer Janus,Agilent Bravo等。
工作原理:
羧化磁珠
CleanNGS采用羧化磁珠,可以特异性结合核酸,非特异性洗脱。相比硅基磁珠,非特异性结合更少,产量更高,更具有专有性。
试剂盒组份
CleanNGS羧基化磁珠,含于PCR结合缓冲液中
使用自备材料
•乙醇 •CleanNA环形磁铁板 •用于DNA洗脱的TE或试剂级水
操作流程:
PCR产物纯化流程(上图)
1 添加CleanNGS和Mix以将NGS文库片段或PCR产物结合到磁珠上。
2 将磁珠磁化以将样品与杂质分离。吸出含杂质溶液。
3 加入70%乙醇清洗磁珠。磁珠磁化。吸出乙醇。重复步骤。
4 加入水从磁珠上洗脱DNA。磁珠磁化并提取纯化的PCR产物。
核酸片段筛选流程(上图)
1.添加第一份CleanNGS到文库中以结合大片段
2.用磁铁将磁珠从溶液中分离出来
3.将含有较小片段的上清液转移到干净的微孔中
4.添加第二份CleanNGS到上清液中以结合目标大小片段
5.用磁铁将磁珠从溶液中分离出来,吸出并丢弃含杂质的上清液
6.用80%乙醇清洗珠子
7.加入水以从珠上洗脱DNA。使用磁铁分离磁珠,并提取纯化和经过大小筛选的DNA核酸片段。
核酸片段筛选举例:0.8x / 0.7x(左/右)片段筛选,样品量50μL
•第一步:
添加0.7 x 50μL= 35μLCleanNGS
将大片段结合到磁珠上
结合和分离后转移上清液
•第二步:
将(0.8-0.7)x 50μL= 5μL CleanNGS加入上清液
将感兴趣的片段结合到新一组的磁珠上
吸出并弃上清液(含有最小的片段)
清洗并洗脱经片段筛选的DNA
第一步:
添加0.7 x 50μL= 35μLCleanNGS
将大片段结合到磁珠上
结合和分离后转移上清液
第二步:
将(0.8-0.7)x 50μL= 5μL CleanNGS加入上清液
将感兴趣的片段结合到新一组的磁珠上
吸出并弃上清液(含有最小的片段)
清洗并洗脱经大小片段筛选的DNA
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