PicoPLEX WGA 试剂采用专利技术,适用array CGH分析及PCR平台。PicoPLEX技术被试管婴儿行业供应商如BlueGnome信赖用于胚胎植入前遗传学筛查。
产品英文名称:PicoPLEXWGA kit
产品中文名称:PicoPLEX单细胞全基因组扩增试剂盒
用途:单细胞或微量基因组DNA样本扩增
PicoPLEXWGA kit采用专利技术,设计、优化用于从单细胞中扩增单拷贝基因组DNA。起始量低至单细胞或6pg基因组DNA。便捷的单管操作流程减少失误,节省时间并降低反应背景。适合胚胎植入前遗传学筛查基因组文库的构建。
Reproducible results from single cells (or <15 pg DNA)
Superior reproducibility of allele representation
Easy to use and automate
Unambiguous results at all resolutions, microarray, and PCR
Store at -20 °C.Guaranteed for 12 months at -20°C in a constant temperature freezer.
CAT. NO. R30050 PicoPLEX® WGA Kit, 50 reactions
PicoPLEX特点
可以单细胞(或<15 pg DNA)起始,生成足够量的基因组样品用于下游分析
易于使用和自动化,单个反应管、3小时,3步反应的简单操作流程
获得可重复结果
PicoPLEX应用
拷贝数变异分析-CNV(aCGH)
单核苷酸多态性分型-SNP
基因突变筛查-PCR
不能直接应用NGS,PicoPLEX DNA-seq Kit可以直接应用NGS。
PicoPLEX技术是胚胎植入前基因筛查胚细胞WGA的金标准。被世界范围内的PGS系统和服务机构广泛使用。
技术原理
PicoPLEX技术:单细胞在单管或单孔中裂解。在预扩增过程中,特殊随机引物与基因组DNA结合延伸,形成发夹结构文库,在接下来的扩增中,只有发夹结构的文库被扩增。
技术优势:利用特殊随机引物(Quasi-random primer)引发线性扩增进行全基因组扩增。
相比于以往的PCR、MDA、MALBC为基础的单细胞全基因组扩增技术,操作简单快速。扩增最大优势:再现性良好。
PicoPLEX WGA Kit适用样本
1.1-10个人细胞,如:囊胚细胞、极体、滋胚层细胞、羊水细胞、循环肿瘤细胞、培养细胞等。
2.1000-10000个细菌细胞
3.分离DNA(15pg-50pg人DNA)
4.分选染色体(Sorted Chromosomes )
5.不完整或片段化,单/双链DNA
6.样本最大体积:5µL
产品组成—PicoPLEX WGA Kit 单细胞全基因组扩增试剂盒
组份
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盖子颜色
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Cell Extraction Buffer
细胞提取缓冲液
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绿色
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Extraction Enzyme Dilution Buffer 提取酶稀释缓冲液
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紫色
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Cell Extraction Enzyme 细胞提取酶
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黄色
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Pre-Amp Buffer 预扩增缓冲液
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红色
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Pre-Amp Enzyme 预扩增酶
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白色
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Amplification Buffer 扩增缓冲液
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桔色
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Amplification Enzyme 扩增酶
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蓝色
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Nuclease-Free water 无核酸酶水
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无色
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User Manual 使用手册
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操作流程
单管,三步。在1个PCR管或微孔中3个小时即可完成。无需样品纯化和转移过程,降低了样品损失,避免了操作污染和操作误差。
单细胞扩增再现性良好
(横轴:反应循环,纵轴:强度)
肿瘤细胞经流式细胞术分选后,采用PicoPLEX WGA Kit 扩增。每个细胞(蓝色曲线)扩增比率相同,并且预期产量相同。不含细胞的样品(绿色曲线;空白模板对照)显示非常低的背景。
适用CNV分析
CNV(拷贝数变异)分析:单个卵裂球样品采用PicoPLEX WGA Kit扩増,标记后与BlueGnome®24sure®arrays杂交(Genesis Genetics Institute),结果清晰地显示了拷贝数变异。2011年ESHRE (欧洲人类生殖与胚胎学会)的临床实验证明了采用PicoPLEX 技术进行人类染色体核型分析的准确性。
名词解释
PGS/PGD:植入前基因筛查和诊断(PGS,PGD)指体外受精(IVF)过程中所做的胚胎或卵母细胞测试,以便选择没有染色体变异或带有家族遗传疾病等位基因的胚胎,提高怀孕成功率,降低特定遗传病的传递风险。
array CGH:微阵列比较基因组杂交。微阵列分析是IVF机构最常用的PGS技术。
NGS:新一代高通量测序。
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