产品名称:BD stain buffer染色缓冲液 500mL装
产品货号: 554656
英文名称:Stain Buffer (FBS)
产品规格:500 mL
产品品牌:BD
产品简介:
BD Pharmingen stain buffer染色缓冲液(FBS)可用于淋巴组织、骨髓、外周血或培养细胞制备的单细胞悬液的免疫荧光染色。染色缓冲液(FBS)对荧光试剂的稀释和应用以及用于流式细胞仪分析的细胞的悬浮液、洗涤和存储都是有用的。基于之前对染色培养基的报道,染色缓冲液(FBS)被配制成中性pH (pH 7.4)缓冲盐溶液(即DPBS),其中添加了热灭活(56°C, 30分钟)胎牛血清(FBS)蛋白。因此,染色缓冲液(FBS)旨在维持细胞活力,并最大限度地提高ph敏感荧光色素(如异硫氰酸荧光素(FITC))产生的荧光信号强度。此外,染色缓冲液(FBS)含有代谢抑制剂。NaN3抑制抗体交联引起的细胞表面抗原的潜在再分配(例如,由于脱落或内化)。因此,在后续的流式细胞术分析中,NaN3(与维持低温环境温度相结合)可以防止免疫荧光染色细胞产生的荧光信号强度的潜在损失。
产品应用:
流式细胞术(常规检测)
运输与储存:
保存在4°C未稀释。
推荐的实验流程:
1. 使用标准方案从淋巴组织、骨髓、外周血或细胞培养中制备单细胞悬液。
2. 在冷染色缓冲液(FBS)中洗涤细胞两次,并通过离心将细胞制成颗粒(例如,在4°C下300 x g)。用冷染色缓冲液(FBS)重悬细胞颗粒至最终浓度为2 × 10e7 cells/ml。
3.将50µl等量的细胞悬液(10e6细胞)分配到试管或微孔板的圆底孔中。
4. 在染色缓冲液(FBS)中稀释荧光抗体至预定的最佳浓度,并将少量稀释抗体(如10µl)加入含有目标细胞悬液的试管或微孔中。在避光冰上孵育20分钟。染色时间可能增加(≥45分钟)取决于荧光抗体的热情。
5. 用200µl(微孔板)或1ml(试管)染色缓冲液(FBS)洗涤细胞两次,以去除未结合的抗体。细胞以300 x g离心5分钟。每次离心后,小心地抽吸(用于微孔板或试管)或倒置并吸走(用于试管)细胞颗粒上清。
6. 将细胞颗粒重悬在200µl(用于微孔板)或0.5 ml(用于试管)的染色缓冲液(FBS)中。将染色细胞从微孔板转移到适当的试管中进行流式细胞分析(将最终体积调整到~0.5 ml)。
7. 染色后尽快(如≤4小时)用流式细胞仪分析染色后的细胞样本。如果必须延迟分析,那么染色细胞可以用缓冲多聚甲醛固定(例如,BD Cytofix™固定缓冲液;猫。编号554655),4°C保存(避光)。应尽快对固定的细胞进行分析(如染色和固定后一周)
注1:染色缓冲液(FBS)同样可以用于细胞的间接免疫荧光染色。在这种情况下,当使用未标记或生物素化一抗时,重复步骤4和步骤5。当使用生物素化抗体和荧光偶联亲和素对细胞进行染色时,最好使用不含生物素的染色介质,如染色缓冲液(BSA) (Cat。554657号)
注2:染色缓冲液(FBS)也可用于固定细胞表达的表面抗原的免疫荧光染色和细胞内抗原(如细胞因子)的免疫荧光染色。细胞内细胞因子染色的细胞可以在流式细胞仪分析之前,在染色缓冲液(FBS)中重悬和维持(例如,在4°C,避光)。
产品订购信息:
货号 名称 规格
554656 BD stain buffer 500mL
关于公司:
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BD Biosciences开发了跨越每条激光线的创新染料,以提供多色实验方案设计灵活性和全面的偶联抗体组合,帮助深度表征表面、细胞内或分泌标记物。从简单到复杂研究应用的流式细胞仪和分选仪,到广泛的试剂选择和教育资源、工具和方案的全面收集,我们支持您有效地管理多色流式细胞仪工作流程。
金山科研平台生物集团——BD代理
金山科研平台生物集团的子公司——是一家为生命科学领域内的科学研究、细胞治疗和生物制药相关人员提供优质产品和服务的生物高科技公司,公司主办的干细胞搜网(w w w.stemcell.so)为中国干细胞领域大资源库,网站提供:干细胞治疗产品、细胞培养试剂耗材、脐带MSC间充质干细胞培养基、IPS细胞ES胚胎干细胞培养基、DC细胞淋巴细胞无血清培养基、R&D细胞因子等种类丰富的产品;涉及StemCell、HY StemCell、StemRD、CellGenix、PeproTech、Corning、Thermo、Gibco、 PALL、LONZA、BD等国际公司品牌和生产厂家。以“Yes Service”核心服务理念,紧紧围绕“Yes Service focus on Biology 越服务 专注生物”打造中华民族全新服务体系,我们与客户携手一起探索生命科学奥秘,解决人类健康问题,发展绿色环保生态,推动世界和谐持续发展。
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