Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法

英文名：Phos-tag™Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution

产　　地：日本

商　　家：Wako（和光纯药工业株式会社）

wao Phos-tag™实验设计

◆ 研究领域

磷酸化蛋白和磷酸化多肽的研究

◆ Phos-tag^TM的简介

Phos-tag^TM（Phosphate-binding tag）是由日本广岛大学的Kinoshita等研制的磷酸化蛋白蛋白捕获分子。Phos-tag^TM螯合Zn2+或者Mn2+等重金属离子后形成一个半封闭的空间。在pH值6~8的中性条件下，该空间恰好能容纳一个磷酸基团，使得螯合有金属离子的Phos-tag^TM分子能够与磷酸基团牢固而稳定的结合。可以特异性结合所有氨基酸的磷酸化基团，广泛运用于细菌，酵母，昆虫等物种研究。

◆ Phos-tag^TM系列产品

利用螯合有金属离子的Phos-tag^TM可以特异性结合磷酸化基团的特点，研发了Phos-tag^TM系列产品，运用于常见的蛋白实验，比如SDS-PAGE，免疫印迹，亲和层析，质谱等。

Phos-tagTM系列产品 产品描述 用途 具体运用实验 Phos-tagTM Acrylamide Phos-tagTM与丙烯酰胺（Acrylamide，SDS-PAGE分离胶主要成分)结合 分离磷酸化和非磷酸化蛋白。SDS-PAGE分离胶制备中添加金属离子（Zn2+或者Mn2+）和Phos-tagTMAcrylamide。在蛋白电泳过程中，磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTMAcrylamide发生特异性结合，导致磷酸化蛋白的迁移速度变慢。 SDS-PAGE（单一蛋白）

免疫印迹（多种蛋白混合液，例如细胞裂解液，组织均浆液，体外激酶反应体系。使用目的蛋白的非磷酸化抗体作为一抗） Phos-tagTMBiotin Phos-tagTM与生物素（Biotin）结合 可与亲和素标记的HRP结合，检测磷酸化蛋白。 免疫印迹（正常SDS-PAGE） Phos-tagTMAgarose Phos-tagTM与琼脂糖（Agarose）结合 利用磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTMAgarose特异性结合，纯化磷酸化蛋白。 亲和层析法 Phos-tagTMMass Analytical kit Phos-tagTM与不同荷质比的Zn结合 检测微量磷酸化蛋白和磷酸化多肽。 质谱实验

备注：除Phos-tag^TMMass Analytical kit之外，其他Phos-tag^TM系列产品都需要配置金属离子溶液。