原代卵巢癌*培养基

简要描述：原代卵巢癌*培养基（Human Ovarian Carcinoma Cell Medium）是一种为促进人源卵巢癌原代细胞体外生长而开发的培养基。

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产品名称：原代卵巢癌*培养基（Human Ovarian Carcinoma Cell Medium）产品说明：原代卵巢癌*培养基（Human Ovarian Carcinoma Cell Medium）是一种为促进人源卵巢癌原代细胞体外生长而开发的培养基。它是一种无菌的液体混合系统，含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质。培养基基于碳酸氢盐的缓冲体系，在5%CO2、37℃培养箱中平衡时，pH值为7.4。该培养基的配方可以提供一个理想人源卵巢癌原代细胞体外培养环境，选择性地促进体外人源卵巢癌原代细胞的生长。产品优势：(1) 培养成功率高

(2) 体外持续扩增

(3) 保持肿瘤原始病理特征

(4) 药敏结果宇临床数据接近

使用说明：◉使用前准备（1）预冷的DMEM/F12培养基稀释基质胶（Corning#356231）（50倍稀释，现配现用），并取适量*覆盖培养容器，在5%CO2、37℃培养箱中包被培养容器底部0.5~3h，使用时弃上清。（2）15mL无菌离心管、移液器、移液管、无菌枪头等表面75%酒精消毒后放入生物安全柜中紫外照射30 min。（3）提前30min从4℃冰箱取出*培养基平衡至室温。◉卵巢癌原代细胞培养（1）至少提前半小时使用稀释后的基质胶预铺培养瓶/板，使用前吸弃基质胶，用稀释液润洗一遍。（2）将分离并计数后的细胞悬液参考表1中细胞数量接种于培养瓶/板，补加*培养基至所需体积，轻轻摇晃混匀，75%酒精表面消毒后置37℃、5%CO2培养箱培养。（3）原代细胞初次接种后2-3天内勿动（利于细胞贴壁），第一次换液建议换半液。◉卵巢癌原代细胞传代（1）镜下观察细胞形成克隆，且汇合度达到85~95%时即可传代。（2）培养箱中取出细胞，弃旧培养液，0.05%胰酶洗涤5秒后吸尽，再加入适量0.05%胰酶，37℃孵育，2~5 min后拿出轻拍培养瓶/板侧面，显微镜下观察细胞消化情况。（3）细胞消化至细胞变圆并开始脱落时用原代细胞终止培养基终止消化，并将细胞转移至离心管中，1500 rpm, 3 min。（4）弃上清，以1-5mL条件培养基重悬细胞，活细胞计数，将细胞悬液按适合的细胞密度接种于培养瓶/板，（不同规格培养瓶/板底面积、接种原代细胞数量如表1所示），补加培养基至所需体积，十字交叉混匀，培养容器75%表面消毒后置37℃、5%CO2培养箱培养。其他步骤同上。注意事项：

本产品在使用前需平衡至室温。

使用产品时应注意无菌操作，避免污染。

本产品中不含血清，含有原代细胞专用抗生素，如无特别需要不用额外再添加血清和双抗，可直接使用。

样本需为肿瘤组织，且肿瘤细胞比例越高（>50%），培养成功率越高。

为保持本产品的理想使用效果，不宜将其过夜放置于室温或较高的温度环境中。

请于保质期内使用本产品，超出保质期，必须放弃使用。

传代消化时切记不要消化过度，不宜超过5min，对细胞造成损伤，影响细胞状态。

本产品仅用于科研用途，不能用于体外诊断。