原代肠癌*培养基-授权代理-中国官网


原代肠癌*培养基

简要描述:原代肠癌*培养基(Human intestine Carcinoma Cell Medium)是一种为促进人源肠癌原代细胞体外生长而开发的培养基。

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产品名称:原代肠癌*培养基(Human intestine Carcinoma Cell Medium)产品说明:原代肠癌*培养基(Human intestine Carcinoma Cell Medium)是一种为促进人源肠癌原代细胞体外生长而开发的培养基。它是一种无菌的液体混合系统,含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质等。培养基基于碳酸氯盐的缓冲体系,在5%CO2、37℃培养箱中平衡时,pH值为7.4。该培养基的配方可以提供一个理想人源肠癌原代细胞体外培养环境,选择性地促进体外人源肠癌原代细胞的生长。产品优势:(1) 培养成功率高

(2) 体外持续扩增

(3) 保持肿瘤原始病理特征

(4) 药敏结果宇临床数据接近

使用说明:◉使用前准备(1)预冷的DMEM/F12培养基稀释基质胶(Corning#356231)(50倍稀释,现配现用),并取适量*覆盖培养容器,在5%CO2 37℃包被培养容器底部0.5~3h,使用时弃上清。(2)15mL无菌离心管、移液器、移液管、无菌枪头等表面75%酒精消毒后放入生物安全柜中紫外照射30 min;提前30min从4 ℃冰箱取出*培养基平衡至室温。◉肠癌原代细胞培养(1)至少提前半小时使用稀释后的基质胶预铺培养瓶/板,使用前吸弃基质胶,用稀释液润洗一遍。(2)将分离并计数后的细胞悬液参考表1中细胞数量接种于培养瓶/板,补加*培养基至所需体积,轻轻摇晃混匀,75%酒精表面消毒后放置培养箱,37℃、5%CO2培养。(3)原代细胞初次接种后2-3天内勿动(利于细胞贴壁),第一次换液建议换半液。◉肠癌原代细胞传代(1)镜下观察细胞形成克隆,且汇合度85~95%时即可传代。(2)培养箱中取出细胞,弃旧培养液,0.05%胰酶洗涤5秒后吸尽,再加入适量0.05%胰酶,37℃孵育,2~5 min后拿出轻拍培养瓶/板侧面,显微镜下观察细胞消化情况。(3)细胞消化至细胞变圆并开始脱落时用原代细胞终止培养基终止消化,并将细胞转移至离心管中,1500 rpm, 3min。(4)弃上清,以1~5mL条件培养基重悬细胞,活细胞计数,将细胞悬液按适合的细胞密度接种于培养瓶/板,(不同规格培养瓶/板底面积、接种原代细胞数量、添加滋养细胞数量如表1所示),补加培养基至所需体积,十字交叉混匀,培养容器75%表面消毒后置37℃、5%CO2培养箱培养。其他步骤同上。注意事项:

    本产品在使用前需平衡至室温。

    使用产品时应注意无菌操作,避免污染。

    本产品中不含血清,含有原代细胞专用抗生素,如无特别需要不用额外再添加血清和双抗,可直接使用。

    样本需为肿瘤组织,且肿瘤细胞比例越高(>50%),培养成功率越高。

    为保持本产品的理想使用效果,不宜将其过夜放置于室温或较高的温度环境中。

    请于保质期内使用本产品,超出保质期,必须放弃使用。

    传代消化时切记不要消化过度,不宜超过5min,对细胞造成损伤,影响细胞状态。

    本产品仅用于科研用途,不能用于体外诊断。

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