尿路感染(UTIs)影响着全球超过1.5亿人,大多数女性一生中至少会经历一次急性膀胱炎发作。尿路感染是初级和二级保健中第二大常见的感染原因,但是,不同年龄阶段表现出的不同临床诊断症状,给诊断增加了难度(与黄金标准尿液培养 24-48 小时的检测相比,精确度只有 50%-80%)1-3。原因不明的尿路感染而使用抗生素的病例占据了15%,这有可能导致抗生素过度使用而出现耐药性。
以尿液为样本的即时检测(POC)可以大大改善尿路感染和其他疾病(如性传染病)的诊断和治疗。但是,POC检测的开发具有挑战性,因为它要求操作方便,简单甚至无需样本预处理,且在常温下能保持稳定性,同时必须具有和实验室检测相同的灵敏度和特异性。
迈迪安的Lyo-ReadyTM可冻干尿液直扩LAMP/RT-LAMP预混液是4x浓度、即用型的优化配方,适用于从尿液样本中直接进行灵敏快速的DNA或RNA等温扩增检测。超qiang灵敏度和可重复性,TTR更快,NTC更延后。
(A) 使用Lyo-ReadyTM 可冻干尿液直扩LAMP预混液的冻干体系 (MDX154,红色) 对尿液样本中的淋球菌、钩端螺旋体、支原体、阴道毛滴虫和单纯疱疹病毒1型(HSV1)进行扩增;(B)使用 Lyo-ReadyTM 可冻干尿液直扩RT-LAMP预混液的冻干体系 (MDX155,红色) 对尿液样本中的基孔肯雅病毒(CHIKV)、丙肝病毒(HCV)、西尼罗河病毒(WNV)、寨卡病毒(ZIKV)或黄热病病毒(YFV)进行扩增。相同的反应中使用NEB WarmStart®LAMP(橙色)和Thermo SuperScriptTM IV RT-LAMP(黑色)进行性能对比。65°C下反应60分钟,检测结果通过TTR显示。误差条代表三个技术重复间的标准偏差。结果显示,与NEB WarmStart®和Thermo SuperScriptTM IV相比,Lyo-ReadyTM 可冻干尿液直扩LAMP/RT-LAMP预混液反应灵敏度更高,扩增更快速(TTR更短)且具有更高的特异性,在所有检测的DNA和RNA病原体扩增中NTC出现的更靠后。
chao强灵敏度可检测1个拷贝DNA或50个拷贝RNA
(A) 使用冻干的Lyo-ReadyTM 可冻干尿液直扩LAMP预混液(MDX154,红色)对20%人体尿液样本中10倍梯度稀释的阴道毛滴虫靶标进行直接扩增(每反应分别含有1,000、100、10和1个拷贝);(B)使用冻干的 Lyo-ReadyTM 可冻干尿液直扩RT-LAMP预混液(MDX154,红色)对5%人体尿液样本中梯度稀释的寨卡病毒RNA进行直接扩增(每反应分别含有2000、500、100和50个拷贝)。相同的反应中使用Lyo-ReadyTM 尿液直扩LAMP预混液的液体体系(MDX154或MDX155,蓝色),NEB WarmStart®LAMP (橙色)和Thermo SuperScriptTM IV RT-LAMP(黑色)进行性能对比。65°C下反应60分钟,检测结果通过TTR显示。误差条代表三个技术重复间的标准偏差。结果显示,Lyo-ReadyTM 可冻干尿液直扩LAMP/RT-LAMP预混液比对比试剂具有更高灵敏度和特异性,扩增更快速(TTR更短)且NTC出现的更靠后。
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