qPCR检测目前是分子检测的黄金标准,但是它需要在实验室里使用专业的设备和研究员进行操作。等温聚合酶链反应,如环介导等温扩增(LAMP)已经成为一种适用于POCT检测的理想方法。
迈迪安的 Lyo-Ready™ RT-LAMP 1-Step Mix 可冻干RT-LAMP一步法预混液是一个4x浓度的预混液,包含了优化的冻干辅料,适用于开发常温稳定的检测。在资源有限的条件下,冷链储运是对POCT检测的主要限制因素之一,常温稳定的检测具有的优势包括减少冷链运输的成本和延长产品保质期等。 迈迪安公司的Lyo-Ready™RT-LAMP 1-Step Mix可冻干RT-LAMP一步法预混液,使开发高灵敏、高性能的RT-LAMP检测变得更容易,并且可以提供开发液体和干燥两种类型检测的灵活性。
和干燥两种类型检测的灵活性。
使用Lyo-Ready™ RT-LAMP 1-Step Mix 可冻干RT-LAMP一步法预混液(橙色)和供应商N (蓝色)分别对连续稀释的登革热2型样本进行扩增,比较平均检测时间TTR。结果表明,与供应商N相比,Lyo-Ready™ RT-LAMP 1-Step Mix 的反应速度更快,TTR更早,并且重复性更高。
使用Lyo-Ready™ RT-LAMP 1-Step Mix(橙色)和供应商N(蓝色)分别对含有不同浓度的 (A) UTM 和痰液,和(B)唾液,以1:10稀释的粗裂解液样本中扩增登革2型RNA。65°C反应60 min。TTR为荧光强度超过最大荧光值10%的阈值的时间。结果表明,与供应商N 相比,即使在有高浓度抑制物的UTM、痰和唾液中,Lyo-Ready™ RT-LAMP 1-Step Mix的平均TTR也更快,反应更灵敏。
试剂性能不受冻干和常温储存的影响。
通过LAMP反应分别对不含(绿色)和含有(蓝色)10%UTM 和痰液 的RNA样本使用PMSD4.1引物进行扩增,并且对比干燥后和新鲜配置的反应液在37℃保存3个月后的性能。TTR为荧光强度超过最大荧光值10%的阈值的时间。结果表明,在37℃的条件下,冻干过程不影响Lyo-Ready™RT-LAMP Mix的稳定性,因此可以推断冻干后混合物的稳定性可达1年。
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