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  美国cellscript试剂盒包括用于体外转录的试剂盒以及使用帽类似物或加帽酶的5' RNA加帽的试剂盒。

l mRNA为什么要加帽:

1、防止5'末端被降解。

2、在细胞中,帮助成熟mRNA穿过核膜,进入胞质。

3、增强翻译。

4、帮助后续可变剪接的过程。

l 加帽类型:

1、Cap 0型(m7G5ppp5Np):仅所加的鸟嘌呤核苷酸被甲基化,存在于单细胞。

2、Cap I型(m7G5ppp5NmpNp):转录本第一个核苷酸的2'-O位也被甲基化,普遍存在于所有细胞。

3、Cap II型(m7G5ppp5NmpNmpNp):转录本第一和第二位的2'-O位都甲基化,存在于10%-15%细胞中。

l 体外加帽的必要条件:

1、在基因组全长克隆时,必须在正向引物5'末端添加T7强启动子序列。

2、以T7启动子作为体外转录启动子。

3、在正向引物5'末端加一个“盖帽G",有利于提高体外转录得到的RNA分子的侵染活性。

美国cellscript试剂盒有:

产品名称

货号

规格

简介

T7 mScript™ Standard mRNA Production System

C-MSC11610

10次

用于体外mRNA的转录过程, 将高产量转录与转录后加帽和加尾的优点集于一身。

C-MSC100625

25次

T7-FlashScribe™ Transcription Kit

C-ASF3507

50次

用于使用T7 RNA聚合酶和经典(GAUC) NTP生产体外转录的RNA。

T7-Scribe™ Standard RNA IVT Kit

C-AS3107

50次

SP6-Scribe™ Standard RNA IVT Kit

C-AS3106

50次

用于使用 SP6 RNA 聚合酶和经典 (GAUC) NTP 生产体外转录的 RNA。

ScriptCap™ m7G Capping System

C-SCCE0625

25次

用于使用 ScriptCap Capping Enzyme、GTP 和SAM对体外转录的RNA进行转录后加帽。可进行cap0和cap1加帽。

ScriptCap™ 2'-O-Methyltransferase Kit

C-SCMT0625

25次

用于将含有Cap 0帽的RNA转化为

含有Cap I帽的 RNA。

ScriptCap™ Cap 1 Capping System

C-SCCS1710

10次

用于使用ScriptCap 加帽酶、ScriptCap 2'-O-甲基转移酶、GTP和SAM对体外转录的RNA进行转录后加帽。Cap 0和Cap I可分别加帽。

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