PCR/qPCR耗材选择——颜色篇


PCR管/板有多种颜色,如透明色、白色、黄色、蓝色、红色……普通的PCR过程中,管/板的颜色并不会影响PCR的结果,但是在qPCR中,管/板的颜色对于结果是有很大的影响的。

应用于qPCR的耗材,一般是白色或者磨砂的塑料耗材。qPCR在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次PCR循环后产物总量,因此与透明塑料管/板相比,白色或磨砂的管/板在应对荧光时表现更为灵敏,并且结果更加准确。这是因为白色的耗材可以阻止荧光折射出管,达到荧光折射的最小化,将更多的荧光信号反射回检测器,从而增加信噪比,表现为更高的灵敏度;另外,白色管壁也可阻止荧光信号被PCR仪的加热模块吸收或进一步反射,从而可以降低重复实验中的误差,提高准确性。除此之外,在进行qPCR时需使用超透明的管盖或光学密封膜来密封PCR管/板,保证荧光不受干扰;还需要参考qPCR的耗材要求,选择最合适的耗材,达到优的实验效果。

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